奶牛乳房炎病原菌分子診斷法的應(yīng)用

說(shuō)到分子診斷法，這個(gè)大家可能覺(jué)得很高大上，尤其對(duì)于我們一線工作的朋友來(lái)說(shuō)，好像是完全科學(xué)研究的范疇。但是這里面我就給大家提到分子診斷法其實(shí)在未來(lái)的若干年內(nèi)一定會(huì)廣泛的用于在牧場(chǎng)里面乳房炎病原菌的診斷流程。目前來(lái)說(shuō)，分子診斷法較常見的一項(xiàng)技術(shù)就是PCR診斷法，簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是把細(xì)菌的DNA提出來(lái)，然后設(shè)計(jì)特異性的引物，引物結(jié)合到DNA上邊，去擴(kuò)增出很多很多的片段。當(dāng)然這個(gè)片段是有一定長(zhǎng)度的，我們通過(guò)判斷這個(gè)片段的長(zhǎng)度去推斷這個(gè)是什么細(xì)菌，分子診斷法的優(yōu)勢(shì)是非常的明顯，就是精準(zhǔn)。這個(gè)當(dāng)然是和微生物培養(yǎng)法相比較而言，它的精準(zhǔn)率是非常高的，基本上如果說(shuō)我們這個(gè)引物設(shè)計(jì)得非常特異性的話，那么它的準(zhǔn)確率可以達(dá)到將近百分之百。
此外它的一個(gè)優(yōu)勢(shì)就是速度比較快，檢測(cè)速度快，現(xiàn)在較快的一個(gè)PCR診斷法大概能夠在4到6個(gè)小時(shí)內(nèi)完成，通常我們培養(yǎng)細(xì)菌在24到48個(gè)小時(shí)之間，像一些比較難培養(yǎng)的病原菌，像支原體這樣的可能得一周以上，所以說(shuō)分子診斷法的優(yōu)勢(shì)還是很明顯的。
當(dāng)然分子診斷法也有他的不足之處，第一個(gè)就是價(jià)格比較昂貴。當(dāng)然這個(gè)價(jià)格包括檢測(cè)設(shè)備的價(jià)格，還包括檢測(cè)耗材，檢測(cè)成本的價(jià)格，設(shè)備通常來(lái)說(shuō)一個(gè)普通的PCR儀可能就需要幾萬(wàn)塊錢，這和建一個(gè)普通的微生物實(shí)驗(yàn)室的價(jià)格是等同的，另外由于檢測(cè)費(fèi)用，由于現(xiàn)在的成本還是比較高的，它的費(fèi)用大概是一百塊錢左右。
其次，在操作方面分子診斷法也是有一定的局限性的，我們說(shuō)他雖然快，但是四到六個(gè)小時(shí)需要一個(gè)人不停的操作，不像微生物培養(yǎng)法，雖然兩天的時(shí)間，但是基本上操作的時(shí)間很少，剩下的時(shí)間是用來(lái)等待，觀察結(jié)果。而對(duì)于分子診斷法，可能對(duì)于操作人員的要求是比較高的。
說(shuō)到這里，目前階段分子診斷法它用于的一個(gè)范疇是什么呢？是不是我們需要對(duì)每個(gè)臨床乳房炎的致病菌、臨床乳房炎的每一個(gè)樣品都用分子診斷法進(jìn)行檢測(cè)呢？我們認(rèn)為這個(gè)是不需要的，是不必要的。通常來(lái)說(shuō)我認(rèn)為，目前分子診斷法用于的范疇，第一個(gè)是用于大罐奶的篩查。也就是說(shuō)每天我們可能有一到兩份大罐奶的樣品，我們通過(guò)PCR看看里面有沒(méi)有這種常見的傳染性致病菌，我們需要關(guān)注特殊的致病菌，我們要去看有沒(méi)有金葡菌、無(wú)乳鏈球菌、支原體等等；如果有的話，可能對(duì)于整個(gè)牧場(chǎng)來(lái)說(shuō)需要警惕這種傳染性乳房炎的存在。
第二就是用于傳染性乳房炎的篩查。如果一旦確定牧場(chǎng)里面存在這種傳染性的致病菌，那到底哪些牛已經(jīng)出現(xiàn)了感染呢？我們需要把這些牛的樣品混合在一起，那么可能每個(gè)圈或者每十頭?；煸谝黄?，通過(guò)分子診斷法進(jìn)行篩查。因?yàn)榉肿釉\斷法的精確度和靈敏性是要高于普通的微生物診斷法的。
第三個(gè)就是在乳房炎爆發(fā)的過(guò)程中。我們可能存在一些主要的致病菌，比如說(shuō)有些牧場(chǎng)里面存在這種無(wú)乳鏈球菌的乳房炎的爆發(fā)，那么無(wú)乳鏈球菌它的傳播途徑和它較主要的存在位點(diǎn)是什么呢？這個(gè)如果我們不通過(guò)檢測(cè)的話我們是不知道的，如果不知道就沒(méi)有辦法對(duì)它進(jìn)行針對(duì)性的防控措施，這個(gè)時(shí)候我們就可以通過(guò)分子診斷法，比如說(shuō)設(shè)計(jì)一條針對(duì)無(wú)乳鏈球菌的引物，去把這個(gè)引物用于不同樣品的檢測(cè)，包括奶廳的樣品、乳房炎的樣品、健康牛的樣品、環(huán)境中、牛的皮膚的樣品等等；這些我們給它進(jìn)行一個(gè)檢測(cè)和統(tǒng)一，較后我們確定無(wú)乳鏈球菌是通過(guò)什么途徑，從牛傳播到其他健康的動(dòng)物上面去的，所以說(shuō)是起到了一種追蹤的效果。
較后我們也可以通過(guò)分子診斷法，對(duì)常規(guī)性的微生物培養(yǎng)法進(jìn)行定期的驗(yàn)證，因?yàn)榉肿釉\斷法的特異性和精確性是比較高的，有時(shí)候我們就可以通過(guò)這樣的驗(yàn)證，去判斷我們微生物培養(yǎng)法，在這一個(gè)階段的精準(zhǔn)性如何。